Какова Очистка Пептида?
Пептиды - малые полимеры, составленные из аминокислот. Многие являются биологически активными как гормоны, токсины, или имеют другие способности. Такие составы часто используются в биологическом, медицинском, и химическом исследовании. Они также служат элементарными звеньями белков, когда числа их соединены. Очистка пептида - методика, используемая, чтобы или очистить большие количества желаемого пептида, или помочь отделить пептиды, произведенные от вываривания белков.
очистка пептидов достигнут при использовании методики хроматографии, способ отделить составы, которые затвердевают дифференцированно к физической матрице. Жидкостная хроматография высокого давления (HPLC) обычно используется для очистки пептида. Пептид или пептиды применены в смеси растворителей, которая изменяется в течение долгого времени, поскольку они накачаны через позвоночник малой стеклянной дроби в высоком давлении. Различные пептиды элюируют в изменяющихся моментах времени и обнаружены монитором, часто УЛЬТРАФИОЛЕТОВЫЙ спектрофотометр.
Проводя исследование в области пептидов, часто сущность интереса редка и не может быть куплена от химических компаний. Если структура желаемого пептида известна, часто легче подготовиться химически синтезом пептида чем изолировать состав от естественных источников. Изоляция натуральных продуктов является общеизвестно трудной. Синтетические пептиды вообще очищены HPLC.
Такой химический синтез может быть пугающим для независимого исследователя, который не является химиком. Часто, из этой задачи выходят к компаниям синтеза пептида, которые специализируются на этих методиках. Это может быть более экономичным чем попытка настроить систему с самого начала в лаборатории. Компании пептида могут сделать таможенные пептиды созданными в соответствии с нуждами исследователя.
Другая причина очистки пептида может состоять в том, когда исследователь очистил белок и пытается определить его идентичность. Он или она может разложить белок во фрагменты пептида, отделить фрагменты очисткой, и иметь образец фрагментации пептидов, обнаруженных масс-спектрометром, поскольку они элюируют из позвоночника. Эта методика известна как НОК, короткие для масс-спектрометрии жидкостной хроматографии. Это дает молекулярную массу и состав аминокислоты фрагментов, и часто запускает идентификации белков, если подобные или идентичные были идентифицированы ранее.
Много исследователей работают с пептидами, у которых есть новые особенности, такие как неестественные аминокислоты, чтобы попытаться найти с необычными биологическими действиями. Есть целая область, названная peptidomimetics, посвященным исследованию таких новых пептидов. Часто, машинно-генерируемые последовательности разработаны, и библиотека пептида синтезируется, который охватывает диапазон нетипичных пептидов. Очистка пептида используется, чтобы отделить отдельные органы этой библиотеки, чтобы обеспечить чистый пептид, чтобы проверить на биологическую активность. Эта стратегия была успешна в производстве по крайней мере одного нового коммерчески доступного препарата.
Многие из биологически активных пептидов являются представляющими интерес для медицинского использования. Составы, используемые коммерчески, такие как инсулин, обычно производятся рекомбинантными системами сверхотжимания ДНК, которые производят большое количество желаемого состава. Часто, пептиды генетически спроектированы, чтобы облегчить очистку, добавляя своего рода признак к их фронтам. Это позволяет использованию афинной хроматографии очищать пептид.
С этим типом хроматографии признак - состав, такой как гистидин, который свяжет матрицу стеклянной дроби, как никель, выбранный для его способности связать признак. Нежелательные белки и пептиды вообще проходят через позвоночник без закрепления. Специально предназначенный пептид обычно затвердевает сильно к позвоночнику. После того, как белки загрязнения и пептиды были смыты, желаемый пептид элюируется составом, который конкурирует за закрепление к матрице. У каждого тогда есть довольно чистая подготовка желаемого пептида, и признак может быть удален дроблением.